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Samarkand est, avec Boukhara, l’une des plus anciennes villes habitées d’Asie centrale, prospérant grâce à son emplacement sur la route commerciale entre la Chine et la Méditerranée (Route de la Soie).

Des fouilles archéologiques menées dans les limites de la ville (Syob et centre-ville) ainsi que dans des zones suburbaines (Hojamazgil, Sazag'on) ont mis au jour des preuves d'activités humaines datant de plus de quarante mille ans et remontant au Paléolithique supérieur. Un groupe de sites archéologiques du Mésolithique (12e au 7e millénaire avant notre ère) a été découvert à Sazag'on-1, Zamichatosh et Okhalik (banlieue de la ville). Les canaux Syob et Darg'om, alimentant en eau la ville et ses banlieues, sont apparus vers le 7ème au 5ème siècle avant JC (début de l'âge du fer). Il n’existe aucune preuve directe de la fondation de Samarkand. Les chercheurs de l'Institut d'archéologie de Samarkand plaident pour l'existence de la ville entre le VIIIe et le VIIe siècle av.

Samarkand est l'un des principaux centres de la civilisation sogdienne depuis ses débuts. À l'époque de la dynastie achéménide de Perse, il était devenu la capitale de la satrapie sogdienne.